|
|
Expression and purification of Tick-borne encephalitis virus Capsid protein
SCHMELZER, Jakob
Tick-borne encephalitis virus (TBEV) is an important pathogen of the family Flaviviridae with an emerging health concern. Virus causes severe neurological disorders to human population in Europa and Asia. Despite effective vaccine, there is no specific antiviral treatment till now. The capsid protein encapsules the viral positive-sense single-stranded RNA and is essential in packaging and assembling of new virions within the host. A deeper understanding of these interactions and their implications should lead to new antiviral strategies and drug design. This thesis deals with the expression and purification of the capsid protein without membrane anchor using Escherichia coli expression system.
|
|
|
The role of Hepatitis B virus capsid protein in the host ubiquitin proteasome pathway
Eliáš, Vratislav ; Weber, Jan (vedoucí práce) ; Šmahel, Michal (oponent)
Vírus hepatitídy B (HBV) patrí do rodiny Hepadnaviridae infikujúcej cicavce. Infekcia HBV môže viesť k akútnej alebo chronickej hepatitíde typu B. Chronická hepatitída B môže vyústiť do hepatocelulárneho karcinómu a cirhózy pečene, ktoré čato nesú fatálne následky. HBV je malý vírus o 42 nm, ktorého genóm má dĺžku 3.2 kb. Kóduje sedem proteínov. HBV Core proteín (HBc) je proteínom zodpovedným za tvorbu kapsidy vírusu. Taktiež, však u ňho bolo odhalených mnoho ďalších funkcií. Podarilo sa nám identifikovať dve ubikvitín ligázy, ktoré by mohli interagovať s HBc: FBXO3 (E3 ubikvitín ligáza) a UBE2O (E2/E3 ubikvitín ligáza). Využitím viacerých metód sa nám tieto interakcie podarilo potvrdiť. Ko-imunoprecipitáciou, a následnou analýzou pomocou western blot metódy, sme odkryli nové náhľady na možnú funkciu týchto dvoch proteínov, čo sa ubikvitinácie HBc týka: FBXO3 zvyšuje hladinu polyubikvitinácie u HBc, zatiaľ čo UBE2O podporuje jeho monoubikvitináciu. Taktiež sme sa zaoberali celkovým dopadom FBXO3 a UBE2O ligáz na životný cyklus a replikáciu vírusu. Potlačením expresie oboch ubikvitín ligáz v HBV transfekovyných bunkách sme prišli k záveru, že FBXO3 inhibuje replikáciu vírusu, kým UBE2O ju naopak podporuje. Je potrebná podrobnejšia analýza novozískaných výsledkov, avšak ich potenciál na lepšie...
|
|
|
The role of capsid protein in hepatitis B virus life cycle
Eliáš, Vratislav ; Weber, Jan (vedoucí práce) ; Drda Morávková, Alena (oponent)
Vírus hepatitídy B (HBV) spôsobuje akútnu alebo chronickú infekciu hepatocytov, často vedúcu k hepatocelulárnemu karcinómu alebo cirhóze pečene. Genóm HBV, dlhý 3.2kb, kóduje sedem proteínov. Dva z HBV kódovaných proteínov sú kapsidové proteíny (HBcAg, HBeAg). HBeAg, predstavujúci solubilnú variantu kapsidového proteínu, zohráva kľúčovú rolu v regulácii imunitnej odpovede hostiteľa. HBcAg sa okrem stavby kapsidy, podieľa na viacerých krokoch životného cyklu HBV. Jeho primárna štruktúra sa rozdeľuje na dve domény: stavebná doména a C-terminálna doména (CTD). Práve CTD, obsahujúca štyri oblasti bohaté na arginín, je rozhodujúcim elementom pre reguláciu životného cyklu. Interakciou s viacerými či už virálnymi, alebo nevirálnymi zložkami riadi priebeh infekcie vedúci k úspešnej replikácii vírusu. V tejto rešerši sme zhrnuli doterajšie dostupné dáta o úlohe HBcAg v životnom cykle HBV. Veríme, že ďalšie skúmanie danej témy prinesie nové terapeutické náhľady na liečbu a prevenciu infekcie HBV, vedúce k zníženiu úmrtnosti na choroby vyvolané vírusom. Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)
|
|
|
The role of Hepatitis B virus capsid protein in the host ubiquitin proteasome pathway
Eliáš, Vratislav ; Weber, Jan (vedoucí práce) ; Šmahel, Michal (oponent)
Vírus hepatitídy B (HBV) patrí do rodiny Hepadnaviridae infikujúcej cicavce. Infekcia HBV môže viesť k akútnej alebo chronickej hepatitíde typu B. Chronická hepatitída B môže vyústiť do hepatocelulárneho karcinómu a cirhózy pečene, ktoré čato nesú fatálne následky. HBV je malý vírus o 42 nm, ktorého genóm má dĺžku 3.2 kb. Kóduje sedem proteínov. HBV Core proteín (HBc) je proteínom zodpovedným za tvorbu kapsidy vírusu. Taktiež, však u ňho bolo odhalených mnoho ďalších funkcií. Podarilo sa nám identifikovať dve ubikvitín ligázy, ktoré by mohli interagovať s HBc: FBXO3 (E3 ubikvitín ligáza) a UBE2O (E2/E3 ubikvitín ligáza). Využitím viacerých metód sa nám tieto interakcie podarilo potvrdiť. Ko-imunoprecipitáciou, a následnou analýzou pomocou western blot metódy, sme odkryli nové náhľady na možnú funkciu týchto dvoch proteínov, čo sa ubikvitinácie HBc týka: FBXO3 zvyšuje hladinu polyubikvitinácie u HBc, zatiaľ čo UBE2O podporuje jeho monoubikvitináciu. Taktiež sme sa zaoberali celkovým dopadom FBXO3 a UBE2O ligáz na životný cyklus a replikáciu vírusu. Potlačením expresie oboch ubikvitín ligáz v HBV transfekovyných bunkách sme prišli k záveru, že FBXO3 inhibuje replikáciu vírusu, kým UBE2O ju naopak podporuje. Je potrebná podrobnejšia analýza novozískaných výsledkov, avšak ich potenciál na lepšie...
|
|
|
The role of capsid protein in hepatitis B virus life cycle
Eliáš, Vratislav ; Weber, Jan (vedoucí práce) ; Drda Morávková, Alena (oponent)
Vírus hepatitídy B (HBV) spôsobuje akútnu alebo chronickú infekciu hepatocytov, často vedúcu k hepatocelulárnemu karcinómu alebo cirhóze pečene. Genóm HBV, dlhý 3.2kb, kóduje sedem proteínov. Dva z HBV kódovaných proteínov sú kapsidové proteíny (HBcAg, HBeAg). HBeAg, predstavujúci solubilnú variantu kapsidového proteínu, zohráva kľúčovú rolu v regulácii imunitnej odpovede hostiteľa. HBcAg sa okrem stavby kapsidy, podieľa na viacerých krokoch životného cyklu HBV. Jeho primárna štruktúra sa rozdeľuje na dve domény: stavebná doména a C-terminálna doména (CTD). Práve CTD, obsahujúca štyri oblasti bohaté na arginín, je rozhodujúcim elementom pre reguláciu životného cyklu. Interakciou s viacerými či už virálnymi, alebo nevirálnymi zložkami riadi priebeh infekcie vedúci k úspešnej replikácii vírusu. V tejto rešerši sme zhrnuli doterajšie dostupné dáta o úlohe HBcAg v životnom cykle HBV. Veríme, že ďalšie skúmanie danej témy prinesie nové terapeutické náhľady na liečbu a prevenciu infekcie HBV, vedúce k zníženiu úmrtnosti na choroby vyvolané vírusom. Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)
|
host ::
RSS.